Kit de extracción de ácidos nucleicos (método de perlas magnéticas)

Uso previsto

Este producto está diseñado para la extracción, el enriquecimiento y la purificación de ácidos nucleicos. La extracción está diseñada para el diagnóstico clínico in vitro.

Principio

Se pueden separar y purificar ácidos nucleicos de alta calidad a partir de muestras complejas mediante un sistema tampón único compuesto por solución de lisis, solución de lavado A y solución de lavado B con función de separación. Las exclusivas perlas magnéticas integradas presentan una fuerte afinidad con los ácidos nucleicos en determinadas condiciones. Las perlas magnéticas liberan los ácidos nucleicos absorbidos cuando cambian las condiciones. Este kit permite extraer ácidos nucleicos con alta pureza y calidad estable, lo cual es adecuado para aplicaciones posteriores sensibles, como la qPCR en tiempo real.

Almacenamiento y estabilidad

Conservar el kit a una temperatura entre 15 y 30 °C y protegido de la luz durante 6 meses.

Transporte a temperatura ambiente.

Fecha de producción y fecha de caducidad: Consulte la etiqueta para obtener más detalles.

Dispositivos aplicables

Operación manual: centrífuga, mezclador de temperatura constante, rack magnético de 2mL (separador magnético).

Requisitos de la muestra

1. Tipo de muestra

saliva.

2. Recolección de muestras

Enjuague la boca con agua limpia 30 minutos antes de la recolección (no se permite recolectar inmediatamente después), presione la punta de la lengua contra la raíz de los dientes maxilares o mandibulares para enriquecer la saliva y escupa suavemente la saliva en el embudo ovalado hasta que la saliva líquida (sin burbujas) alcance la línea de llenado de 2 ml. Desenrosque con cuidado el embudo del tubo de recolección (asegúrese de que el tubo de recolección esté en posición vertical durante el uso). Apriete la tapa roja y selle el tubo de recolección. Compruebe que el tubo de recolección de muestra esté en buen estado y que no haya ningún desbordamiento de muestra, como un tubo agrietado o una tapa abierta. Deseche el embudo usado.

Procedimiento de prueba

1. Pretratamiento de la muestra

Centrifugue la muestra de saliva a 3000 rpm a 4 ℃ durante 10 minutos y recoja el sobrenadante en un tubo de centrífuga nuevo (tenga cuidado de no transferir el precipitado); el tubo de centrífuga se centrifugó a 13000 rpm a 4 ℃ durante 2 minutos y el sobrenadante recolectado se pudo extraer del ácido nucleico de la muestra.

2. Extracción manual

2.1 agrietamiento de la muestra

Agregue 300 μL de muestra (la muestra debe estar equilibrada a temperatura ambiente), 20 μL de solución de proteinasa K y 500 μL de tampón de lisis a un tubo de centrífuga de 1,5 mL, agite durante 10 segundos y luego colóquelo en un mezclador de temperatura constante a 80 ℃ y 1200 rpm durante 4 min.

2.2 adsorción de ácidos nucleicos

Agregue 10 μL de tampón de perlas magnéticas al tubo de centrífuga, agite durante 10 segundos y luego colóquelo en un mezclador de temperatura constante a temperatura ambiente y 1200 rpm durante 4 minutos.

Coloque el tubo de centrífuga sobre el soporte magnético y, una vez que las perlas magnéticas se hayan absorbido por completo, absorba con cuidado todo el líquido.

2.3 Enjuague de muestra 1

Agregue 500 μL de tampón de lavado A al tubo de centrífuga, agite durante 10 segundos y luego colóquelo en un mezclador de temperatura constante a temperatura ambiente y 1200 rpm durante 2 minutos.

Coloque el tubo de centrífuga sobre el soporte magnético y, una vez que las perlas magnéticas se hayan absorbido por completo, absorba con cuidado todo el líquido.

2.4 Enjuague de muestra 2

Agregue 500 μL de tampón de lavado B al tubo de centrífuga, agite durante 10 segundos y luego colóquelo en un mezclador de temperatura constante a temperatura ambiente y 1200 rpm durante 2 minutos.

Coloque el tubo de centrífuga sobre el soporte magnético y, una vez que las perlas magnéticas se hayan absorbido por completo, absorba con cuidado todo el líquido.

2.5 Elución de ácidos nucleicos

Seque el tubo de centrífuga durante 2 a 5 minutos para asegurarse de que no queden residuos de agua.

Agregue 50 μL de tampón de elución en el tubo de centrífuga, agite durante 10 segundos y luego colóquelo en un mezclador de temperatura constante a 56 ℃ y 1200 rpm durante 5 minutos.

Coloque el tubo de centrífuga en el soporte magnético y, después de que las perlas magnéticas se hayan adsorbido, recolecte la solución de ácidos nucleicos en un nuevo tubo de centrífuga y guárdelo a -20 ℃ o a -80 ℃ durante un tiempo prolongado.